جداسازی و ارزیابی تنوع ژن های وابسته به بیماری زایی (pr) تعدادی از گونه های درختان میوه دانه دار

به دلیل پیچیدگی روابط گیاه با عوامل بیماری زا، شناخت ساختارهای ژنتیکی مقاومت گیاه در مقابل این عوامل از جمله ژن های مرتبط با بیماری زایی (pr genes) از اهمیت بالایی برخوردار است. این تحقیق با هدف جداسازی و ارزیابی تنوع این ژن ها در ژنوتیپ های سیب (malus×domestica)، گلابی معمولی (pyrus communis)، گلابی برگ بیدی (p. salicifolia) و به (cydonia oblonga) انجام شد. طراحی آغازگرهای اختصاصی و نیمه اختصاصی روی نواحی حفاظت شده ژن های pr1a، pr3-ch1، pr3-ch2، pr3-ch3، pr3-ch5، pr5 وpr8 از گونه های دولپه های نزدیک انجام و روی dna استخراج شده با استفاده از روش تلفیقی ctab-sds ارزیابی شد. تعداد ژنوتیپ مورد بررسی در گونه سیب، گلابی اروپایی، گلابی برگ بیدی و به ترتیب 7، 7، 1 و 12 عدد بود. پس از بهینه سازی شرایط دمایی و غلظتی واکنش pcr مربوط به هر جفت آغازگر، مشخص شد که امکان انتقال پذیری جفت آغازگرهای طراحی شده به درختان میوه دانه دار در مورد اغلب ژن های pr مورد نظر وجود داشت. بر اساس نتایج بررسی هومولوژی برای اولین بار ژن های pr1a،pr3-ch1 ، pr3-ch3، pr3-ch5 ، pr5 و pr8 در برخی ارقام بومی و یا وارداتی سیب، ارقام گلابی و به و ژنpr3-ch4 در سیب و گلابی جداسازی و پس از تعیین توالی در بانک اطلاعاتی به ودیعه گذاشته شدند. بررسی میزان تنوع ژنتیکی ژن های جداسازی شده با استفاده از توالی یابی نشان داد که ژن های حاصل با وجود موتاسیون های نقطه ای، از هومولوژی نسبتاً بالایی در بین گونه های درختان میوه دانه دار برخوردارند.